Estudio molecular de la proteína cloroplástica CCS de soja

La chaperona de cobre para la CuZn superóxido dismutasa (CCS) libera Cu+ a la CuZn superóxido dismutasa (CuZnSOD). La CuZnSOD cloroplástica (CSD2) es una enzima antioxidante capaz de eliminar los radicales superóxido generados durante el transporte electrónico fotosintético. En este trabajo se ha estudiado la regulación de la expresión de los genes GmCSD2 y GmCCS en suspensiones celulares fotosintéticas y planta entera de soja (Glycine max) en condiciones control y en exceso de cobre. Ambos genes están regulados por un mecanismo de “splicing” alternativo con retención de intrón, y su expresión se induce fuertemente en respuesta al exceso de Cu. A nivel de proteína, la expresión de GmCCS se mantiene constante en respuesta al Cu. La chaperona se encuentra formando mayoritariamente estructura oligomérica localizada en el estroma y en el tilacoide. La expresión de la enzima GmCuZnSOD es indetectable en condiciones control pero se induce fuertemente en respuesta al Cu. Se ha purificado la proteína recombinante GmCCS de suspensiones celulares con un alto grado de pureza. La proteína se obtiene como apo y es activa ya que une dos moles de Cu+ y un mol de Zn2+ por mol de proteína.